Développement d'une méthode de quantification du Monophosphoryl Lipid A (MPL) par Uplc-Elsd

Abstract

Le monophosphoryl lipid A est une molécule issue de la bactérie Gram négative, Salmonella minnesota R595, utilisée en tant qu’adjuvant dans la formulation vaccinale humaine pour ses propriétés immunostimulantes. L’objectif de ce travail de fin d’études est de mettre en place un outil d’analyse permettant la quantification de cette molécule. Pour cela, une méthode analytique de quantification a été développée recourant à l’utilisation d’un système de chromatographie en phase liquide de ultra haute performance couplée à un détecteur évaporatif à diffusion de lumière (UPLC®-ELSD). Ce développement s’effectue en deux étapes : une première phase de recherche et d’expérimentation aborde le développement de cette méthode analytique pharmaceutique de manière traditionnelle. Une variable unique est étudiée tout en maintenant les autres variables constantes. La deuxième phase, quant à elle, est guidée par les principes du QbD (Quality by Design). Un plan d’expérimentation de criblage (Plackett-Burman) permet d’étudier simultanément plusieurs variables. Finalement la méthode UPLC®-ELSD développée est validée par l’étude de la linéarité des réponses, les limites de quantification (LOD) et les limites de détection (LOQ). Ce mémoire apporte donc un nouvel outil analytique fiable qui permet de poursuivre le développement des connaissances sur les formulations vaccinales.