Les rôles post-transcriptionnels de la fusion EWS-FLI1 dans le sarcome d'Ewing

Abstract

Le sarcome d’Ewing est une tumeur osseuse maligne affectant principalement les enfants et jeunes adultes à raison de 1,5 cas par million d’individus et par an. Génétiquement très simple, ce cancer est caractérisé, dans 85% des cas, par une translocation chromosomique entre les gènes encodant la protéine EWS de la famille FET et le facteur de transcription FLI1 de la famille ETS. La fusion résultante EWS-FLI1 possède un domaine activateur de la transcription associé à un domaine de liaison à l’ADN. Par conséquent, la protéine EWS-FLI1 a largement été considérée et étudiée comme un facteur de transcription aberrant. Cependant, plusieurs évidences indiquent que EWS-FLI1 est impliqué dans des fonctions post-transcriptionnelles. Au laboratoire d’Expression des Gènes et Cancer du Professeur Franck Dequiedt, des résultats préliminaires suggèrent que EWS-FLI1 régule la stabilité des ARNm par recrutement du complexe de déadénylation CCR4-NOT. Durant ce mémoire, notre objectif était d’investiguer trois autres moyens par lesquels EWS-FLI1 pourrait réguler la stabilité du transcriptome : l’interaction avec une machinerie de dégradation autre que CCR4-NOT, l’interaction avec un complexe de méthylation de l’ARN, et l’interaction avec des facteurs d’export de l’ARNm. Après avoir réalisé une librairie de plasmides encodant de multiples facteurs de dégradation, de méthylation, et d’export de l’ARNm, nous avons testé leur interaction avec EWS-FLI1. De manière générale, nous avons montré qu’un facteur de dégradation cytoplasmique (PABPC1), certaines protéines du complexe de méthylation de l’ARN (METTL3, METTL14 et WTAP), ainsi que des facteurs d’export de l’ARNm (NXF1, NXF2 et NXF3) interagissent avec FLI1, tandis que ces interactions sont résiduelles ou perdues dans le contexte de la fusion EWS-FLI1. D’une part, nos résultats suggèrent que FLI1 est un facteur de transcription impliqué dans un vaste réseau d’interactions lui permettant de participer à de multiples processus moléculaires, tant au niveau transcriptionnel qu’au niveau post-transcriptionnel. D’autre part, le fait que ces interactions soient compromises dans le cas de la fusion EWS-FLI1 indique une modification du réseau d’interactions dans les cellules du sarcome d’Ewing, ce qui contribuerait au cancer. Ce travail est à poursuivre dans le but de confirmer les interactions obtenues et d’élucider leurs conséquences d’un point de vue fonctionnel.